机体若长期处于脂质代谢失调、红枣血脂成分异常的色素食小鼠状态下,会导致高脂血症的对高发生,进而引发动脉粥样硬化,脂饮脂作从而促发高血压、降血冠心病、红枣脑血栓等多种疾病。色素食小鼠目前,对高通过调整膳食结构、脂饮脂作中药调理及适当运动能预防血脂升高,降血而治疗高脂血症的红枣必要手段是服用降脂药。国内外降血脂药物主要有他汀类、色素食小鼠贝特类、对高烟酸类等,脂饮脂作这些药物可有效调节血脂代谢,降血降低血脂水平,但价格高昂,且存在不同程度的毒副作用,如他汀类药物可能会导致肌肉萎缩,增加Ⅰ型糖尿病的患病率,不宜长期服用。因此,寻找无毒高效的降血脂天然成分极为必要。
近几年,人们开始从天然植物中提取、分离功能活性成分,如蓝莓花色苷、木棉花总黄酮、佛手多酚等研究调节血脂的作用,并取得了一定成效。从枣类食品生产的废弃枣渣中提取的红枣色素是一种水溶性天然色素,已被证实能清除自由基,具有较好的抗氧化活性、抗脂质过氧化能力,邵佩兰等又进一步证实了红枣色素含有多酚、花色苷和黄酮等活性成分,且其抗氧化活性与黄酮和多酚含量呈正相关,此外,红枣色素对KBrO3诱导的肾损伤、拘束性肝损伤和常压缺氧有明显的改善作用,但红枣色素能否调节高脂小鼠的脂质代谢紊乱,改善脂类成分失衡,抑制高脂血症尚未见报道,本文研究红枣色素的降血脂作用,以期为红枣色素在功能性保健食品行业的开发应用提供一定的理论依据。
一、材料与方法
1、材料与仪器
红枣色素:宁夏大学食品营养与分析实验室制备;ICR健康雄性小鼠(体重18~22g):宁夏医科大学实验动物中心提供,生产许可证号SCXK(宁)2015—0001;高脂饲料(基础饲料52%,猪油20%,蔗糖10%,全脂奶粉6%,大豆分离蛋白10%,磷酸氢钙2%):江苏协同医药生物有限公司,总胆固醇试剂盒、甘油三酯试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇试剂盒、载脂蛋白A1试剂盒、载脂蛋白B试剂盒、总酯酶试剂盒:南京建成生物工程研究所,辛伐他汀:济南利民制药有限责任公司;其他试剂均为分析纯。
U3010紫外可见分光光度计,日本日立有限公司;CT14D11台式高速离心机,美国Labconco公司;Alphal—4真空冷冻干燥机,德国Christ公司;HH.S11—2电热恒温水浴箱,上海博迅实业有限公司;MultiskanMk3酶标仪,上海热电上海仪器有限公司。
2、试验方法
(1)动物分组、给药及处理
小鼠在实验环境下喂基础饲料观察5d,将60只小鼠按体重随机分为空白对照组、高脂组、阳性对照组和红枣色素低、中、高剂量组,每组10只。实验期间除空白对照组喂基础饲料外,其余各组均喂高脂饲料,同时灌胃给予受试物。红枣色素组分别以312.5mg/kg、625mg/kg和1250mg/kg灌胃,阳性对照组以辛伐他汀(5mg/kg)灌胃,空白对照组和高脂组给予等量生理盐水,连续4周。末次给药后,小鼠禁食不禁水16h,称量体重,摘眼球取血,收集血液于抗凝管中,于40C、3500r/min离心10min,分离血清。小鼠颈椎脱臼处死,解剖取出各脏器,称重,并将肝脏放入玻璃匀浆管中,加入9倍体积的40C生理盐水,充分研磨制成10%肝组织匀浆。
(2)体重、脏器指数的测定
实验过程中每一周定期称量,记录小鼠体重。将解剖取出的脑、心脏、肝脏、脾脏、肾脏用生理盐水冲洗除去表面杂质,滤纸吸干,称重,并计算小鼠脏器指数。
(3)血脂、载脂蛋白含量的测定
取各组血清,按照测定试剂盒操作说明分别测定血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、ApoA1和ApoB含量,并计算AI。
(4)脂蛋白脂酶、肝脂酶活力的测定
取各实验组10%肝匀浆,按照总酯酶试剂盒操作说明分别测定肝脏LPL、HL活力,并根据公式计算总酯酶活性。
总酯酶活性(U/mL)=脂蛋白脂酶活性+肝脂酶活性
3、数据处理
所有实验数据以均数±标准差来表示。结果采用SPSS13.0进行单因素方差分析,以p<0.05为具有显著性差异,p<0.01为具有极显著性差异。
二、结果与分析
1、红枣色素对小鼠体重脏器指数的影响
红枣色素对小鼠体重的影响如表1所示,随着饲喂时间的推移,各组小鼠体重均有增加,而高脂组小鼠体重较空白对照组增加4.83g(p<0.05),表明长期高脂饮食会使小鼠体重增加。在给予红枣色素干预后,红枣色素低、中、高剂量组小鼠相对高脂组体重减少1.77.2.05、2.66g(p<0.05),说明红枣色素在一定程度上可以抑制高脂饮食导致的小鼠体重增加,且剂量越大,抑制效果越显著。
脏器指数能直观的反映实验动物的营养状态和脏器的病变情况。红枣色素对小鼠脏器指数的影响如表2所示,与空白对照组相比,高脂组小鼠脑/体、心/体、肝/体指数均明显升高(p<0.05),表明长期高脂饮食可能会引起肝脏的病理性变化(充血、水肿、增生或炎症等)及心脑血管损伤。与高脂组相比,红枣色素能明显降低小鼠的肝/体指数(p<0.05),且呈一定剂量依赖性,说明一定剂量红枣色素对肝脏具有保护作用。这与单科开提取的苦菜黄酮效果一致,但低剂量苦菜黄酮对小鼠肝脏指数影响不显著,且高剂量效果相比红枣色素较差,可能是二者灌胃的黄酮含量存在差异导致。
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