2.6 指纹图谱建立及分析 2.6.1 指纹图谱的建立鹃素建立 取“2.1”项的对照品溶液和“2.2”项下供试品溶液，按“2.3.1”项的满山色谱条件，使用高效液相色谱仪检测。红叶含量所得满山红叶HPLC对照图谱见图4，指纹15批满山红叶色谱叠加图见图5。图谱 图4所示，并测该指纹图谱找到10个共有峰，定杜通过与对照品色谱图对比，建立鹃素确认10号峰为杜鹃素，满山并将9号峰作为参照S峰。红叶含量
2.6.2 相似度分析 采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件”(2012版)，指纹采用中位数法依次进行15批满山红叶指纹图谱的图谱相似度评价，结果见表9。并测根据表9能够得出，定杜15批满山红叶纹图谱整体相似度在0.986～0.999，建立鹃素均>0.9，具有较高的一致性。
将15批满山红叶的10个共有峰峰面积导入SPSS 20.0，运用平均欧式距离法，进行聚类分析，见图6。分类结果表明不同产地满山红药材在分类距离上较远，即使同一产地其分类距离也存在明显差异性。初步分析，可能与满山红药材采摘时间、贮存方式、气候等有关。15批满山红叶在产地和批次上其主化学成分种类具有代表性，指纹图谱能够反映出样品的全貌。
3 讨论 本实验供试品的制作方法，考察了不同提取溶剂和提取方式对满山红叶指纹图谱的影响。在提取溶剂方面，选取了水、60%甲醇、稀乙醇三种溶剂作为提取溶剂，结果发现，满山红冻干粉在三种溶剂中的溶解度都很好，但是以水作提取溶剂的色谱图无论在出峰数目还是分离度上均优于其他两种溶剂的色谱图，因此选择水作为提取溶剂。在提取方式方面，选择了超声提取法和回流提取法，结果发现，2种方法提取的满山红叶色谱图差别很小，但是超声提取方法更加简便，因此选择超声的方法作为提取方法。 本实验对于色谱条件的确定，考察了色谱柱、检测波长、流动相系统，流速、柱温对满山红叶指纹图谱的影响。在色谱柱方面，选了Shim-Pack XR-ODSⅤ（2.0 mmi.d×150 mm）、Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm）和YMC-Pack ODS-A(4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱，结果表明样品在Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm）和YMC-Pack ODS-A(4.6 mm×250 mm,5μm）中不能达到分离要求，而在Shim-Pack XR-ODSⅤ（2.0 mmi.d×150 mm）色谱柱中不仅出峰快、数目多而且分离度符合要求，所以选择Shim-Pack XR-ODSⅤ（2.0 mmi.d×150 mm）色谱柱作为该实验色谱柱。 在检测波长方面，用二极管阵列检测器检（DAD）中200～400 nm依次扫描对照品溶液和供试品溶液，结果显示在检测波长297 nm处2个样品均有最大吸收，色谱图信息丰富，杜鹃素峰高较高，所以选用297 nm为检测波长。在流动相系统方面，选取不同种类有机相（甲醇、乙腈）和不同成分水相（0.3%甲酸水溶液、0.3%醋酸水溶液）构成的流动相系统对供试品溶液色谱峰分离的影响，筛选乙腈-0.3%甲酸水溶液、甲醇-0.3%甲酸水溶液、甲醇-0.3%醋酸水溶液等流动相系统，结果显示，乙腈-0.3%甲酸水溶液流动相系统不利于样品的分离，出峰数目稀少且分离度不好，甲醇-0.3%甲酸水溶液和甲醇-0.3%醋酸水溶液流动相系统对样品分离差别不明显，但是甲醇-0.3%甲酸水溶液流动相系统色谱图信息更丰富，分离度更好，故确定该流动相系统作为该实验检测的流动相。在流速方面，选择了0.1 mL·min-1、0.2 mL·min-1、0.25 mL·min-1进行筛选。结果表明，用0.1 mL·min-1流速检测色谱峰出峰不完全，用0.25 mL·min-1流速检测色谱峰分离度不好，用0.2 mL·min-1流速检测色谱峰出峰数目完全，分离度较好，故确定流速为0.2 mL·min-1。在柱温方面，对25℃、30℃、35℃柱温进行筛选。结果表明升高柱温，分离效果变差，因此确定了25℃作为检测柱温。 15批满山红叶的指纹图谱整体相似度范围0.986～ 0.999，均>0.9，相似度良好，15批满山红叶中杜鹃素含量RSD为0.11%，表明其含量没有明显差异，但是聚类分析结果将15批满山红叶分为四类，且10个共有峰峰面积的RSD范围6%～30%，说明杜鹃素的含量对其整体含量变化影响很小，其他化学成分含量变化起主要作用，初步分析应该与满山红中草药产地、生长环境、采摘时间、放置条件和放置时间等有关。 本研究运用高相液相色谱分析法，建立了满山红叶的指纹图谱，该指纹图谱可以全面展现满山红叶化学成分的特点，适用于因产地、批次、生长环境等因素的不同，出现的质量不均一的满山红叶。该方法简便易行，指纹峰分离度好，具有较高的可信度，为后续满山红叶的研究开发提供科学依据。 声明：本文所用图片、文字来源《长春中医药大学学报》，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除。 相关链接：对照品，色谱，图谱 |
玻璃与塑料金属用什么粘 如何使用玻璃胶粘接材料,行业资讯adidas Originals x Dime跨界合作 发布新系列时近其三十岁生日 BAPE品牌发布两款全新的MAD STA鞋款INVINCIBLE x Helinox SU23 户外系列主打的就是一个反转 MSCHF发布「BWD」的新鞋款食品包装和接触竹材的壳聚糖防腐研究（一）Titan和Jordan Brand再出联名鞋款系列 亮眼夺目Faune 气质or灵动 谁是你的白月光？玻璃与塑料金属用什么粘 如何使用玻璃胶粘接材料,行业资讯软糯的AJ甜点 鞋友们 这是否是你们想要的企业开办全流程“一件事一次办” 江苏全力打造优化营商环境新高地玻璃磨边机进入数控时代,行业资讯美国公布太阳能双反终裁 欧洲恐跟进,行业资讯新型中空玻璃在北玻下线,企业新闻河南三门峡市较早的太阳能光电建筑项目投产发电,行业资讯护肤品牌RéVive将正式进军中国市场会发电的玻璃幕墙,行业资讯叮当猫 春夏季节 这样穿吸睛又好看北京石景山：开展冬奥场馆周边重点商圈专项检查在迎新程 报喜鸟战略性收购Woolrich错过第三期伟业计量线上研讨会直播？别惆怅，精彩回放新鲜出炉！甲醇中毒死蜱溶液标准物质：环境监测与质控优选医用防辐射服有哪些品牌值得推荐？如何选择合适的医用防辐射服？陕西：部分动力用煤产品氟含量、灰分、汞含量不符合要求银泰百货股权变更 男装品牌雅戈尔接棒Exor加速发行法拉利股份 筹集约30亿欧元助力新并购玻璃企业弱点亟待克服,市场研究山东荣成开展电暖设备专项检查北京延庆开展化妆品“线上净网 线下清源”专项整治工作运动鞋品牌代工厂华利集团透露市场积极信号规则让短视频发展得更长远陕西强化防疫产品质量监管 助力疫情防控中空玻璃专业委员会六届二次常委会报道,行业资讯玻璃行业旬报:价格、供需环比稳定,企业点火意愿略有增强,行业资讯“1 N”双随机联合抽查助推广西崇左经济高质量发展山东青岛 “零延时”“零距离” 让执法有力度、 服务有温度2012光伏(博鳌)论坛将探讨光伏电站(企业)新模式,行业资讯榴莲广告与产品货不对版 盒马被罚5万元瑞士钟表出口额持续下滑 市场萎缩引发行业关注守护纯真 陪伴成长 开启奇妙冒险！
